中药抗肿瘤机制研究进展

 
摘要：中药具有价格便宜、副作用少等特点，且很多中药有抗肿瘤作用，所以近年从中药中寻找抗肿瘤的药物成为研究的热点，中药成分复杂，其抗肿瘤的机制也表现在多个方面，目前主要表现在提高机体免疫力、诱导肿瘤细胞凋亡、逆转肿瘤细胞多药耐药、抑制肿瘤血管生成、对化疗的减毒增效作用、抑制端粒酶活性、直接细胞毒作用，下面对这几方面做些总结。

关键词：中药  抗肿瘤  综述
    世界卫生组织预测，到2020年，每年新发癌症病人数将达到1500万，癌症将成为新世纪人类的第一杀手，并将成为全球最大的公共卫生问题。我国癌症发病率占全球的五分之一，死亡率占癌症发病人数的80%。可见，癌症已经严重威胁人类健康，寻找有效的抗肿瘤药物与方法迫在眉睫，研究表明很多中药具有抗肿瘤作用，而对其抗肿瘤机制的研究将对抗肿瘤中药的开发具有深远意义。以下将对近几年有关中药抗肿瘤机制的研究进展进行简单综述。

1调节机体免疫功能
    机体的免疫状态与肿瘤的发生、发展密切相关, 当宿主免疫功能低下或受抑制时, 肿瘤的发病率增高, 而在肿瘤进行性生长时, 肿瘤患者的免疫功能又会受到抑制, 可见免疫功能低下是阻碍宿主战胜疾病及恢复健康的重要因素, 因而提高宿主的免疫功能及其活力是当前肿瘤防治的有效途径之一。中医理论认为，恶性肿瘤患者均存在正气虚弱，邪气内侵。因此，扶正固本、补益气血、驱邪解毒可能是治疗肿瘤的一种原则。目前很多关于补益、清热解毒等药调节免疫功能的研究，像黄芪多糖、灵芝多糖、香菇多糖等中药多糖及当归补血汤、五行汤等中药复方等能激活多种免疫细胞,活化补体系统和刺激网状内皮系统,从而提高宿主对肿瘤细胞的特异性抗原免疫反应能力，提高免疫功能，改善宿主生存质量^【1-8】。张红军^【9】用C57BL/6小鼠建立S180荷瘤小鼠模型，给予玉屏风散治疗，计算抑瘤率,检测巨噬细胞吞噬活性, 巨噬细胞NO分泌量, 自然杀伤细胞(NK)活性, T淋巴细胞增殖能力及白介素-2 (IL-2)的产生及活性来观察玉屏风散对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响，结果显示，玉屏风散可提高荷瘤小鼠吞噬细胞的功能, 增加巨噬细胞NO分泌量, 促进荷瘤小鼠白介素-2 (IL-2)的产生, 淋巴细胞的转化、及NK细胞活性。可见，玉屏风散可增强荷瘤小鼠的免疫功能, 抑制模型鼠肿瘤的生长。

2诱导肿瘤细胞凋亡
    细胞凋亡又称程序性细胞死亡,是由于机体内、外环境变化或死亡信号触发,在基因调控下引起细胞主动死亡的过程。细胞凋亡规律失常是肿瘤发生与发展的一个重要因素。肿瘤细胞的凋亡与多种基因直接相关，如凋亡抑制基因家族bcl-2，c-myc和凋亡诱导基因p53基因等。bcl-2家族包括凋亡家族Bax、bcl-xs、Bad、Bak和抑凋亡家族bcl-2、bcl-xl、ced-9、Al、BHRF-1、MCL-1等，凋亡家族和抑凋亡家族比例影响着细胞调控系统，从而最终决定细胞是否凋亡^{【10，11】}。何景利等^【12】在三氧化二砷联合顺铂对人结肠癌细胞株colon26抑制作用机理的研究中发现As₂O₃能通过下调bc1-2和上调bax的表达来诱导肿瘤细胞凋亡。柴可群等^【13】观察中药抑肺饮对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤的抑制作用，采用流式细胞术检测CD95,Bcl-2，免疫组化法检测Caspase-3，TUNEL法检测凋亡指数，结果抑肺饮可明显抑制移植瘤的增长，升高凋亡指数，显著下调Bcl-2的表达，并上调CD95(Fas)及Caspase-3的表达。表明抑肺饮对肿瘤抑制作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。

3逆转肿瘤细胞多药耐药
    多药耐药(multidrug resistance，MDR)是指细胞一旦对某种药物产生耐药，同时对其他在结构和作用机制上不同的药物也产生交叉耐药性。多药耐药常常是化疗失败的一个主要原因。多药耐药的机制主要为：①经典MDR，是由P-gp（P糖蛋白，P-glycoprotein）介导的MDR；②不典型MDR，即耐药细胞内DNA拓扑异构酶(TOPO)数量减少，结构改变及活性降低引起的MDR；③非Pgp介导的MDR^【14】。魏素菊等^【15】观察斑蝥酸钠(SCA)对多药耐药的白血病细胞(K562/AO2)细胞是否有逆转作用，并初步探讨其逆转机制。耐药细胞(K562/AO2)经SCA处理后mdr1基因与P-gp蛋白表达较对照组均显著下降。可见，SCA对K562/AO2有一定的逆转作用，其机制可能与下调mdr1基因和P-gp蛋白表达有关。李贵海等^【16】观察粉防己碱对获得性多药耐药小鼠S180肿瘤细胞TOPOⅡ表达的调控，结果粉防己碱可明显降低TOPOⅡ活性，从而干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生。解霞等^【17】观察蝎毒对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的影响及机制研究。蝎毒可显著降低耐药细胞内谷胱甘肽S转移酶的活性，猜测其逆转机制与降低GST酶活性有关。

4抑制肿瘤血管生成
    肿瘤生长及转移与肿瘤血管生成密切相关,新生血管为肿瘤组织提供充足的养分,同时发育不完善的微血管也为肿瘤细胞进入循环转移扩散提供便利。当前,抗肿瘤血管生成已经成为众多治疗恶性肿瘤策略中新的靶点。血管新生在体内受到一系列因子调节,其中以血管内皮生长因子(VEGF)最为重要，它是肿瘤扩增和维持血管功能的关键因子。因此，抑制VEGF可以阻止肿瘤生长，达到治疗肿瘤的效果。唐春兰等^【18】观察姜黄素Ⅲ对A549裸鼠移植瘤VEGF蛋白表达的影响，免疫组化染色检测裸鼠移植瘤组织中VEGF的表达，ELISA检测血清中VEGF的含量，结果表明，姜黄素Ⅲ组VEGF的量显著低于阴性对照组，说明姜黄素Ⅲ有抗肿瘤血管生成的作用。另外一些凋亡抑制基因也与血管生成有关，如Survivin.李承龙等^【19】用免疫组织化学方法检测胃癌组织中Survivin的表达和微血管密度（MVD），用巢式RT-PCR方法检测胃癌患者外周血癌细胞微转移，结果68.3%胃癌组织Survivin表达阳性，Survivin阳性肿瘤的MVD显著大于Survivin阴性肿瘤，说明胃癌组织中Survivin表达的增加与胃癌组织血管化程度及周围静脉血微转移密切相关。可以猜测，抑制Survivin的表达可能是一种抑制肿瘤的方法。

5对化疗的减毒增效作用
    目前化疗是治疗肿瘤的主要手段之一，并且疗效可靠，但是其毒副作用大，限制了化疗药的广泛应用。很多研究表明，中药和化疗药合用能增强机体免疫功能，改善化疗药物对骨髓造血系统的抑制，起到增效减毒的效果。赵娜等^【20】通过建立S180荷瘤小鼠模型，灌胃和静脉注射牛磺酸两种途径与环磷酰胺合用，检测各组小鼠的抑瘤率、骨髓有核细胞数、外周血白细胞数、脾指数、胸腺指数、脾淋巴细胞增殖活性和腹腔巨噬细胞吞噬能力等指标来研究牛磺酸对环磷酰胺增效减毒作用，实验结果为两种途径与环磷酰胺合用对S180荷瘤的抑制率均比单一使用环磷酰胺高，外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、胸腺指数、脾指数、脾淋巴细胞增殖活性和腹腔巨噬细胞吞噬能力均增高。可见，牛磺酸对环磷酰胺具有增效减毒的作用。

6抑制端粒酶活性
    端粒是染色体末端一种能稳定其结构和功能的特殊成分，人端粒是真核细胞染色体3’末端的非编码DNA序列，主要由“5-TTAGGG-3”片段重复串联组成，大约重复2 000次左右，长度范围为5-15kb。端粒结合蛋白与端粒DNA结合，在细胞内形成环套结构，并可使端粒免受酶及其他理化因素的影响而降解。端粒酶位于端粒末端，是一种细胞RNA依赖的DNA聚合酶，端粒酶的主要作用是与自身携带的RNA模板合成端粒重复DNA序列，并加到端粒末端而维持端粒的长度，以抵消或延缓端粒随细胞分裂的不断缩短^【21】。端粒酶的高表达及防止端粒短缩是促进癌组织克隆、繁殖、发展的基础。现已发现人类80% ~90%的恶性肿瘤可以检测到端粒酶阳性,而大多数正常体细胞不表达端粒酶活性^【22】。石嵘等^【23】以300μg/mL莪术油处理乳腺癌MCF-7细胞，采用MTT法测定细胞增殖活性，绘制生长曲线，筛选最佳药物处理时间。于加药后48 h，实时定量RT-PCR检测端粒酶催化亚单位hTert表达水平、TRAP Assay检测端粒酶活性变化，莪术油处理的MCF-7细胞24 h后增殖活力开始降低，至48 h生长明显减缓，实时定量RT-PCR结果表明，加药后48 h，hTert表达水平降低为对照细胞的2.43倍，TRAP Assay结果显示端粒酶活性降低为对照细胞的2.27倍。可见，莪术油可以hTert作为下游靶分子，通过调控端粒酶活性，抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖。

7直接细胞毒作用
    细胞毒类抗肿瘤药物是指能够直接杀伤肿瘤细胞或抑制肿瘤细胞生长、增殖的一类药物。目前很多中药提取物或有效成分在体外的实验中均具有一定的细胞毒性。像研究比较多的姜黄素、白藜芦醇、紫杉醇、苦参碱等等在体外对不同的肿瘤细胞均有很好的抑制作用^【24-27】。

8结语
    中药的多种成分决定了其抗肿瘤的作用机制也是复杂的，近年研究已从上述方面着手并取得一定的成绩，但离客观、定性、定量的评价研究还有一段距离，还需要广大研究者们进行深入的研究。相信通过现代技术与中药本身的特性结合去研究，将会在中药抗肿瘤方面取得更大的进步。

参考文献
[1]  李豪侠.黄芪多糖对老年人胰腺癌晚期患者生存质量、细胞免疫功能的影响[J].中国中医药科技，2010，5，17（3）：243，244
[2]  杨琬芳，王桂琴，郝芳.灵芝多糖和DCN合用对荷瘤小鼠免疫功能影响的实验研究[J].世界中西医结合杂志，2009，4（4）：245-247
[3]  林卡莉，吕军华，徐鹰，等.香菇多糖调节荷瘤小鼠的免疫功能[J].解剖学杂志，2009，32（2）：166-169
[4]  侯洪宝，高世勇，季宇彬.螺旋藻多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及红细胞免疫功能的影响[J].中草药，2009，（40）：200-202
[5]  朱小玉，张祥忠，钟雪云，等.参芪扶正注射液对血液恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响[J].中国中西医结合杂志，2010，2，30（2）：205-207
[6]  陈鹊汀，刘智勤，朱惠学，等.当归补血汤对荷瘤小鼠化疗后免疫功能的影响[J].时珍国医国药，2010，21（1）：120，121
[7]  孙慧茹，杨庆有.温阳散结解毒汤的抗肿瘤作用及其对免疫功能影响的实验研究[J].中医研究，2010，4，23（4）：24-27
[8]  莫非，胡晶莹，甘愉，等.五行汤对黑色素瘤小鼠抑瘤作用及免疫功能的影响[J].中国癌症杂志，2008，18（3）：186-189
[9]  张红军.玉屏风散对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响[J].细胞与分子免疫学杂志，2008，7，25（7）
[10]  杜建.中药抗肿瘤机制研究进展[J].福建中医学院学报，2009，8，19（4）：1-5
[11]  郭宇飞，孙秀琳.中药诱导肿瘤细胞凋亡过程中对Bcl-2基因表达的研究[J].中成药，2009，7，31（7）：1100，1101.
[12]  何景利，王贵英，单宝恩.三氧化二砷联合顺铂对人结肠癌细胞株colon26抑制作用机理的研究[J].中国肿瘤临床，2005， 32(19): 1125-1128
[13]  柴可群，赵同伟，卢丽琴，等.从诱导细胞凋亡机理探讨中药“抑肺饮”对肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤抑制瘤作用的实验研究[J].中华中医药学刊，2009，7，27（7）：1388-1391
[14]  陈泽涛，董倩.肿瘤细胞多药耐药及其中医药研究[J].山东中医药大学学报，1999，9，23（5）：332-335
[15]  魏素菊，时爱春.斑蝥素钠逆转K562/AO2细胞多药耐药的机制初探[J].实用肿瘤杂志，2007，22（5）：401-404
[16]  李贵海，刘明霞，孙付军，等.粉防己碱对获得性多药耐药小鼠S180肿瘤细胞P170，LRP，TOPOⅡ表达的调控[J].中国中药杂志，2005，8，30（16）：1280-1282
[17]  解霞，赵瑾瑶，高清波，等.蝎毒对人乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药的影响及机制研究[J].大连医科大学学报，2006，10，28（5）：376，377，383.
[18]  唐春兰，杨和平，李剑明，等.姜黄素Ⅲ对A549裸鼠移植瘤VEGF蛋白表达的影响[J].第三军医大学学报，2005，5，27（9）：831-833
[19]  李承龙，夏加增，李建平，等.胃癌中Survivin的表达与肿瘤血管生成及周围静脉血微转移的关系[J].中国现代医学杂志，2009，19（14）：2202-2204
[20]  赵娜，王蕾，牟红元，等.牛磺酸对环磷酰胺增效减毒作用的研究[J].癌症，2009，28（3）：244-248.
[21]  纪冬，游绍莉.端粒酶的研究进展[J].军医进修学院学报，2010，3，31（5）：508-510
[22]  高超，刘颖，蔡晓敏，等.白花蛇舌草对宫颈癌Hela细胞周期、凋亡及端粒酶活性的影响[J].徐州医学院学报，2010，30（7）：466-468
[23]  石嵘，姜立，周珏宇，等.莪术油对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及DNA损伤反应的调控作用[J].中药新药与临床药理，2010，7，21（4）：350-354
[24]  崔建东，胡义德.姜黄素与顺铂联合对人肺腺癌A549细胞增殖抑制作用的体外研究[J].四川医学，2006，1，27（1）：1-3
[25]  廖纪元，曾洁.白藜芦醇对宫颈癌细胞株Hela增殖的影响[J].咸宁学院学报（医学版），2008，22（1）：13-15
[26]  朱丽红，魏丽惠，李小平，等.紫杉醇脂质体对宫颈癌Siha细胞体外杀伤作用的研究[J].中国肿瘤，2008，17（8）：704-707
[27]  滕小玲，金畅，周仲楼，等.苦参碱对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究[J].浙江医学，2007，29（4）：318-320
作者：王木兰，江西中医学院，研究生，中药药理方向，15970434150,545958570 @qq.com